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DNA質(zhì)粒提取的原理是什么？

在沒有質(zhì)粒提取試劑盒之前，大多提取質(zhì)粒都是自己配置試劑來提取大腸桿菌中的質(zhì)?！，F(xiàn)在的試劑盒只是改了一個名字而已，試劑還是那幾個試劑。用的原理還是那個原理：堿裂解法從大腸桿菌制備質(zhì)粒，是從事分子生物學(xué)研究的實驗室每天都要用的常規(guī)技術(shù)。那么你知道DNA質(zhì)粒提取的原理是什么嗎？讓我們一起來看看吧！一、為什么用無水乙醇沉淀DNA？用無水乙醇沉淀DNA，這是實驗中常用的沉淀DNA的方法。乙醇的優(yōu)點是可以任意比和水相混溶，乙醇不與核酸起任何化學(xué)反應(yīng)，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。D...

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細胞復(fù)蘇有何注意事項？

細胞復(fù)蘇是指將凍存在液氮或者-70℃冰箱中的細胞解凍之后重新培養(yǎng)，細胞恢復(fù)生長的過程。那么你知道在細胞復(fù)蘇過程中有何注意事項嗎？讓我們一起來看看吧！1.取凍存細胞時應(yīng)做好防護措施，戴好防凍手套，護目鏡。如果凍存管密封不嚴，液氮可被吸入。由于解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，將可能發(fā)生爆炸。2.細胞放入水浴中復(fù)蘇時注意用鑷子夾住細胞凍存管并在水浴中不時晃動，使其受熱均勻，且速度越快越好，這樣可以最大限度的保存細胞活力，并防止水浴鍋的水進入細胞凍存管造成細胞污染。3.打開細胞凍存管之...

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什么是原代細胞培養(yǎng)和細胞生長曲線？

你知道什么是原代細胞培養(yǎng)，和細胞生長曲線嗎？，讓我們一起來看看吧！一、原代細胞培養(yǎng)原代培養(yǎng)是指由體內(nèi)取出組織或細胞進行的shou次培養(yǎng)，也叫初代培養(yǎng)。原代培養(yǎng)離體時間短，遺傳性狀和體內(nèi)細胞相似，適于做細胞形態(tài)、功能和分化等研究。較為嚴格地說是指成功傳代之前的培養(yǎng)，此時的細胞保持原有細胞的基本性質(zhì)，如果是正常細胞，仍然保留二倍體數(shù)。但實際上，通常把第一代至第十代以內(nèi)的培養(yǎng)細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。常用的原代培養(yǎng)有組織塊培養(yǎng)和分散細胞培養(yǎng)。一、細胞生長曲線細胞生長曲線是測定細胞絕對...

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如何選擇熒光定量PCR中的對照？

對照的目的是對檢測的各個環(huán)節(jié)進行監(jiān)控，因此我們按照檢測的流程對對照進行梳理。那么我們應(yīng)該如何選擇熒光定量PCR中的對照呢？讓我們一起來看看吧！一、陽性對照和陰性對照陽性對照和陰性對照是指在相同的處理條件下，比如一份已知的感染樣品和一份已知的未感染樣品，都進行了提取和擴增最終獲得了陽性結(jié)果和陰性結(jié)果。陰陽性對照強調(diào)處理過程與樣品一致，并且有明確的預(yù)期結(jié)果。二、擴增對照我們通常說的陽性對照和陰性對照指的是擴增試劑盒中附帶的不需要提取的陽性對照和陰性對照，更準(zhǔn)確的定義應(yīng)該是擴增陽性...

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你知道熒光定量PCR的應(yīng)用嗎？

熒光定量PCR（Real-timePCR），是指在PCR擴增反應(yīng)體系中加入熒光基團，通過對擴增反應(yīng)中每一個循環(huán)產(chǎn)物熒光信號的實時檢測,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。那么你知道熒光定量PCR的應(yīng)用嗎？讓我們一起來看看吧！一、分子生物學(xué)研究1.核酸定量分析：對傳染性疾病進行定量定性分析，病原微生物或病毒含量的檢測,比如近期流行的甲型H1N1流感，轉(zhuǎn)基因動植物基因拷貝數(shù)的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。2.基因表達差異分析：比較經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達差...

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